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构树的组织培养和快速繁殖研究

?作者: 组培设备 发布时间:2020-05-22 17:34?? 浏览次数:

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  构树是桑科多年生叶树种,又名谷浆树等。构树适应性广,生长速度快,耐瘠。脱渭,维护成本低。它具有很高的观赏价值,可以单独种植,成排(行道树)或成组种植。它是优良的造林树种。利用现代生物技术,对构树进行组织培养和快速繁殖。对构树茎段进行离体培养和繁殖,筛选出构树茎段不定芽诱导、不定芽增殖和壮苗生根的培养基,为实现快速无性繁殖、扩大种源生产和保存优良品种提供了有效的方法。

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  1材料和方法

  1.1测试材料

  在优良的母树上选择完整和健壮的枝条作为试验材料。

  1.2试验方法

  1.2.1外植体的消毒。用蘸有洗衣粉的细刷子刷收集的树枝,并用自来水冲洗30分钟以上。用75%酒精在洁净的工作台上浸泡15-30秒,用无菌水冲洗一次,用0.15%氯化汞溶液消毒6-8分钟,用无菌水冲洗3-4次;滤纸吸干后,将1-1.5厘米带芽茎段切下,接种在芽诱导培养基上。

  1.2.2芽诱导培养。以MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA(0.1、0.5、1.0、2.0毫克/升)、NAA(0.1、0.2、0.5、1.0毫克/升),通过正交试验设计16个处理。每种处理重复3次,重复9种植物。30天后,调查芽分化率(外植体数量/分化不定芽的外植体总数)、分化系数(不定芽总数/从外植体分化的外植体总数)和不定芽生长状况。

  1.2.3芽增殖培养。以质谱为基础培养基,加入不同浓度的6-BA(0.1、0.5、1.0、2.0毫克/升)和NAA(0.1、0.2、0.5毫克/升)。通过正交试验设计了12个处理。每次处理重复3次,每次9株。30天后,研究芽的增殖因子和不定芽的生长状态。

  1.2.4壮苗的生根培养。以1/2MS为基本培养基,添加不同浓度的NAA(0.1、0.2、0.5、1.0毫克/升),共进行4个处理,每个处理重复3次,每次9株。40天后,观察生根率(生根苗数/生根苗总数)、平均生根数(总生根数/生根苗数)、根状态和不定芽生长状态。

  1.2.5培养条件。在MS培养基中加入2%蔗糖和0.6%琼脂,5.8 ~ 6.0,培养温度252,光照强度2000 ~ 3000勒克斯,光照时间12小时/天

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  2结果和分析

  2.1芽诱导培养

  接种后2周茎段底部形成茎段愈伤组织,3周后观察到不定芽形成。当MS6-BA1毫克/升NAA 0.1毫克/升时,不定芽诱导率高,芽生长势好,切口愈伤组织适宜。然而,添加其他激素的诱导率较低或较高,但不定芽生长较弱。认为MS6-BA1毫克/升NAA 0.1毫克/升是诱导不定芽的培养基。

  2.2 芽增殖培养

  芽诱导培养后形成的生长健壮的含有多个芽的芽丛切割成单芽,并将芽丛中2cm 以上的单芽切割成含有一个腋芽的茎段接种在芽增殖培养基上,不定芽接种后2 周左右可观察芽的增殖情况。6-BA 浓度越高,芽的增殖倍数越大,但新芽生长细弱叶色淡绿,综合考虑认为MS+6-BA 0.5 mg/L +NAA0.1 mg/L 为不定芽增殖的培养基。

  2.3 壮苗生根培养

  当不定芽长到2~3cm 高时转移到壮苗生根培养基上。2 周后有不定根产生,40 天时观察认为4 种不同浓度的生根培养基对诱导均有明显的效果,其中1/2MS+NAA 0.1mg/L 培养基生根率较高,不定芽生长较好

  2.4组培苗的移植

  当瓶苗长到4-6片叶和3-5厘米株高时,即可炼苗移栽。取出瓶苗,用清水清洗根培养基,种植在珍珠岩、蛭石和泥炭土混合的111基质中,用塑料薄膜覆盖,增加空气湿度,提高成活率,幼苗成活后每2周用稀释的培养基母液对叶表面进行施肥,使幼苗健康生长。

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  3展望

  以构树的带芽茎段为外植体进行不定芽的组织培养,通过调节培养基中的激素配比,大大加快了不定芽的分化速度,繁殖系数达到5-10倍,可以在短时间内提供大量的种苗,解决了根蘖,构树常规播种繁殖速度慢的现状改变了扦插等方法,不仅解决了构树苗木需求量大的问题,为造纸、饲料等相关行业提供了充足的苗木来源,也为转基因品种的保存、遗传转化和培育筛选奠定了坚实的理论基础。

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