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中华枸杞组培快繁技术研究

?作者: 组培设备 发布时间:2019-03-25 11:32?? 浏览次数:

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  枸杞(Lycium chinense),落叶小灌木,茄科,枸杞属,17世纪中叶被引种到法国,其后在欧洲、地中海沿岸国家及美洲国家相继栽培和发展。枸杞为名贵的中药材,又是良好的滋补品。近年来,枸杞又发展成为保健饮料和食品的加工原料,需求量日益增加。中华枸杞分布在我国东北、河北、山西、陕西等地区。中华枸杞用种子繁殖,其后代分离严重,选出的优良植株,靠分蘖繁殖很慢,用常规扦插方法,存在繁殖材料来源有限,成活率低等问题。本试验以辽宁省农业科学院引进的中华枸杞的嫩芽作为外植体,采用组培的方法扩繁,具有用材少,繁殖系数高,速度快等优点。

  1 材料与方法

  1.1 材料选择

  材料于2015年7月采于辽宁省农业科学院院内,选生长旺盛、健康的中华枸杞植株,采当年生的嫩枝作为外植体。

  1.2 外植体处理

  选用优良单株当年生嫩枝,剪去叶片,只留有嫩芽,用洗衣粉水洗去表面污垢,用流水冲洗30 min左右。将嫩枝剪成2 cm左右带1个芽的小段,放入75%乙醇溶液中浸泡5~10 s,用无菌水冲洗,用滤纸吸干,再放入0.1%的氯化汞溶液中消毒,芽消毒时间设计3、5、7 min,用无菌水冲洗3~4次,将带芽的茎段两端与氯化汞接触处各切掉0.5 cm,接种到诱导培养上。

  1.3 培养基选择

  1.3.1 诱导培养基选择

  以Ms为基本培养基,分别添加6-BA 0.5、1.0、2.0 mg/L和 IAA 0.1、0.5、1.0 mg/L浓度的激素,共计9个组合,pH值调为5.8,添加3% 浓度的绵白糖。将处理好的外植体接种到以上培养基中,每瓶接种一个芽。

  1.3.2 增殖培养基

  以Ms为基本培养基,分别添加6-BA 0.5、1.0、2.0 mg/L和 IAA 0.5、1.0、2.0 mg/L浓度的激素,共计9个组合,pH值调为5.8,添加3% 浓度的绵白糖。将诱导出的愈伤组织切成0.5 cm见方的小块,接种到增殖培养基中,每瓶接种1块。

  1.3.3 生根培养基

  以1/2 Ms为基本培养基,分别添加 NAA0、0.1、0.5、1.0 mg/L,共计 4个组合,添加 2%浓度的绵白糖。待不定芽长到2 cm左右时切下接种到生根培养基中,每瓶接种4个芽,接种20瓶,14 d后统计生根情况。

  1.3.4 生根苗移栽

  待瓶苗生有2~3条以上根时即可进行移栽,移栽基质分别设定草炭、草炭∶河沙1∶1、草炭∶蛭石1∶1、河沙四种组合,14 d后观察成活率。

  2 结果与分析

  2.1 外植体灭菌时间选择

  如表1所示,枸杞芽的最佳灭菌时间是5 min,时间过短芽表面的菌不能完全杀死,时间过长由于芽的组织比较嫩,氯化汞会把芽的生长点破坏掉,使芽不能萌发,也不能产生愈伤组织。

  表1 外植体灭菌时间的选择

  

 

  2.2 诱导培养基的选择

  将灭完菌的芽接种到6-BA与IAA的9个组合中(见表2),每个组合中均有愈伤组织长出,但数量和质地有很大差别,高浓度的6-BA的组合中长出的愈伤组织大都产生了玻璃化的现象,只有少量的芽长出,6-BA 0.5与IAA 0.1的组合长出的愈伤组织呈绿色,质地紧密有多量的芽长出,由此可见,这配比组合有利于枸杞的愈伤组织的诱导。

  2.3 芽增殖培养基的选择

  将带有芽的愈伤组织切成带芽小块,每瓶接种1块愈伤组织,每个组合接种40瓶,芽数随机,15 d后统计增殖芽数。高浓度的6-BA与低浓度的IAA组合有利于芽的增殖,高浓度的IAA与低浓度的6-BA组合有利于芽的生长,在生产中应选择既有利于芽分化又有利于生长的激素,以6-BA 0.5+IAA 2.0的组合效果最佳。

  2.4 生根培养基的选择

  将超过2 cm的芽切下接种到生根培养基中,以1/2 MS为基本培养基,不添加任何激素均能生根,但生根率较低,添加NAA 0.1~0.5效果最好,生根率可达98%。

  2.5 栽培基质的选择

  选择生有2~3条根,生长健壮的苗进行移栽,移栽前2 d把瓶盖打开炼苗,移栽时将苗根部的琼脂清洗干净,防止滋生霉菌导致根系腐烂。由图1可以看出,草炭∶河沙=1∶1的基质适合枸杞组培苗的生长,移栽后苗注意遮荫,待14 d左右苗完全成活后,撤掉遮荫。

  表2 不同6-BA、NAA对芽诱导的影响

  

 

  表3 不同6-BA、NAA对芽增殖的影响

  

 

  表4 不同6-BA、NAA对芽增殖的影响

  

 

  

 

  图1 不同移栽基质对生根苗成活率的影响

  3 结论

  适合中华枸杞芽的灭菌时间是5 min,芽诱导最佳培养基以Ms基本培养基添加6-BA 0.5与IAA 0.1,芽增殖以Ms基本培养基6-BA 0.5+IAA 2.0的组合效果最好,1/2 Ms添加NAA 0.1-0.5适合生根,栽培基质以草炭∶河沙=1∶1为宜。

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